采卵
在確定的時間采卵。采卵的途徑有:
剖腹直視下穿刺卵泡取卵;經(jīng)腹腔鏡取卵;B超引導(dǎo)下經(jīng)腹壁、尿道膀胱或陰道穿刺取卵。
卵子培養(yǎng)
吸出卵泡液后,立即尋找卵子。
取出卵細(xì)胞后,需要將其置入裝有人工培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿內(nèi),并放入一定量的卵泡液,有助于卵細(xì)胞的生長發(fā)育。
培養(yǎng)時間取決于所取卵泡的成熟度,成熟者一般培養(yǎng)2~6小時。
胚胎移植
陰道及宮頸用生理鹽水清潔再用培養(yǎng)液擦洗,將金屬或塑料導(dǎo)管置入頸管內(nèi)。培養(yǎng)液,將此管插入宮頸管導(dǎo)管內(nèi)放至距宮底0.5cm處,送胚胎入宮腔。胚胎移植后需臥床24小時,限制活動3~4天,接受黃體酮治療。
移植后2周,需要做β-GCG測定,如無妊娠情況,則停用黃體酮。
體外授精
收集精液后應(yīng)用洗滌法使精液體外獲得,然后放入裝有卵細(xì)胞的培養(yǎng)液內(nèi),培養(yǎng)15~24小時,在解剖顯微鏡下檢查,如看到有兩個原核存在于卵母細(xì)胞原漿中表示已授精,再繼續(xù)培養(yǎng)36~42小時。
當(dāng)鏡下觀察到受精卵已分裂至4~8個細(xì)胞時,可考慮作胚胎移植。